C18色譜柱(十八烷基硅膠柱)是液相色譜中最常用的反相柱,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、環(huán)境、化工等行業(yè)的成分分析、純度檢測(cè)及雜質(zhì)分離。市面上C18柱種類繁多,選擇合適的C18柱對(duì)于分離效率、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性及方法開發(fā)至關(guān)重要。下面從關(guān)鍵參數(shù)、應(yīng)用場(chǎng)景、選擇建議、常見品牌等方面系統(tǒng)說明。 一、C18色譜柱選擇需關(guān)注的主要參數(shù) 1. 硅膠基質(zhì)(粒徑、純度、孔徑) 粒徑(Particle size):常見有5 μm、3 μm、2.6 μm、1.7 μm。粒徑越小,分辨率越高但柱壓越大。 端基覆蓋(End-capping):未端基覆蓋的柱子硅醇基活性大,容易出現(xiàn)拖尾尤其對(duì)堿性化合物不利。優(yōu)選充分端基處理的柱子。 孔徑(Pore size):常規(guī)為80–120 ?(適合小分子),300 ? 適合蛋白、肽等大分子。 2. 碳載量與鍵合方式 碳載量(%C):決定疏水性,碳載量高保留能力強(qiáng),一般8%–22%。樣品極性大選低載量,回收速率快;疏水性強(qiáng)選高載量柱。 鍵合方式:?jiǎn)捂I合/雙鍵合,有些柱子有特殊工藝,如雙端基保護(hù),更耐酸堿或高溫。 3. 柱規(guī)尺寸 柱長(如100、150 mm)、內(nèi)徑(如4.6、2.1 mm)決定理論塔板數(shù)與通量,分析型與半制備型選取不同。 一般標(biāo)準(zhǔn)柱為4.6×250 mm或4.6×150 mm,UPLC小柱為2.1×50 mm等。 4. 柱的pH適應(yīng)范圍 部分C18柱只能用在pH 2-8范圍,有些耐pH 1-12,需看樣品體系、流動(dòng)相設(shè)定。 5. 柱床均勻性&批次一致性 優(yōu)質(zhì)品牌柱子具備高重現(xiàn)性,批次間性能差異很小,對(duì)定量分析尤為重要。 |
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